島津液相色譜柱是一款新開發的高純硅膠液相色譜柱。具有高分離度、高惰性、高柱效、耐污染等特點,該系列色譜柱可在較寬pH范圍、較高比例水相流動相條件下穩定使用。廣泛適用于食品、藥品、環境等多個領域的分析檢測項目。其通過優化的表面鍵合密度,在保證良好分離效果的前提下,可提供適中的疏水作用力,化合物洗脫更快,分析效率更高。在與島津高分離度系列VP-ODS和GIS C18的對比實驗中可以看到,使用SHIMSEN Ankylo C18色譜柱可獲得相當的分離效果,同時出峰更迅速。柱效更高,峰形也更尖銳。
島津液相色譜柱的操作流程:
一、前期準備與核對
操作前需核對色譜柱型號、規格、最大耐壓、耐受溫度、適配流動相體系,確認與檢測方法一致。檢查柱身完好無裂紋、兩端堵頭密封完整,同時確認儀器管路無氣泡、泵體與接頭無滲漏。提前過濾流動相與樣品,水系、有機相流動相均需經0.45μm或0.22μm濾膜過濾并超聲脫氣,樣品必須過濾后上機,避免雜質堵塞柱篩板、損傷固定相。
二、色譜柱安裝規范
嚴格按照柱身標注的FLOW流向箭頭安裝,嚴禁反向使用,防止固定相脫落、柱效下降。安裝時保持接頭平整,手緊擰牢后輕微扳手加固,避免過緊壓壞密封墊或過松漏液。安裝完成后確認色譜柱適配流速與壓力上限,常規4.6mm內徑色譜柱初始流速控制在0.2–0.5mL/min,禁止高流速、高壓瞬間沖擊色譜柱。
三、新柱活化與平衡(核心步驟)
出廠保存溶劑多為甲醇或乙腈,需充分活化舒展碳鏈。先以低流速0.2mL/min開機,逐步升至常規分析流速,用純甲醇或純乙腈沖洗20倍柱體積,徹d潤濕固定相、去除柱內保護溶劑。若后續使用含水流動相,需梯度過渡,禁止純有機相直接切換高比例水相,避免固定相塌陷、柱壓驟升。
更換檢測方法或流動相體系時,需提前用過渡溶劑沖洗柱內殘留溶劑,再用目標流動相平衡色譜柱,直至基線平穩、壓力穩定、保留時間恒定,方可進樣分析。含緩沖鹽的流動相平衡時間需適當延長,確保柱內體系完q穩定。
四、樣品分析過程操作
分析期間嚴格控制柱溫、流速、壓力在色譜柱耐受范圍內,常規色譜柱柱溫不超過40℃,避免高溫加速固定相老化。嚴禁強酸、強堿、高濃度鹽溶液長期過柱,緩沖鹽流動相不可長時間滯留柱內。定期觀察柱壓與峰形,若出現壓力異常升高、峰拖尾、保留時間漂移,需立即停止進樣排查問題。分析過程禁止隨意更改流速、柱溫、流動相比例,保證檢測數據穩定可靠。
五、分析后清洗操作
含緩沖鹽、離子對試劑的體系,必須先用水相沖洗除鹽,以10%甲醇水溶液沖洗5–10倍柱體積,徹d洗脫柱內殘留鹽分,防止鹽結晶堵塞篩板、腐蝕固定相;再切換純甲醇或純乙腈沖洗10–20倍柱體積,去除殘留樣品與極性雜質。
純有機、無鹽體系檢測結束后,直接用純乙腈或甲醇沖洗穩定即可。清洗全程梯度降流速,禁止直接停泵,避免壓力驟變產生柱內氣泡、損傷填料。
六、色譜柱再生與維護
若出現柱壓升高、柱效下降、峰形異常,需針對性再生。反相C18柱可依次用水、甲醇、異丙醇沖洗,去除強保留雜質;重度污染可低濃度酸堿體系溫和沖洗后,再純水、有機相復原。正相柱、氨基柱、氰基柱需嚴格參照原廠方法再生,禁止通用反相清洗體系,避免不可逆損傷。
七、拆卸與長期保存
清洗完成、系統壓力平穩后,緩慢降低流速至0,拆卸色譜柱,立即用原裝堵頭密封兩端,防止柱內溶劑揮發、填料干裂。常規反相柱長期保存封存純甲醇或乙腈;特殊極性柱、親水柱按原廠要求保存,禁止留存水相、緩沖鹽溶液。同時做好使用登記,記錄使用時間、流動相體系、樣品類型,便于后續維護追溯。
八、核心禁忌注意事項
禁止超壓、超溫、反向使用色譜柱;禁止未過濾樣品、渾濁液體直接上機;禁止緩沖鹽長期滯留柱內;禁止高低濃度溶劑直接切換,避免相析沖擊填料;避免色譜柱劇烈震動、磕碰,保護柱床結構完整。